human CA19-9 ELISA KITL5E100596人份/盒 | 生物诊断试剂 | 上海领潮生物科技有限公司

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产品名称：human CA19-9 ELISA KIT
产品型号：L5E1005
产地：China
制造商：上海领潮生物科技有限公司
产品规格：96人份/盒
产品报价：1200RMB 元(人民币) / PCS
关注度：150 次 [产品手册下载]
供应商：上海领潮生物科技有限公司
公司位于：上海市市辖区
备注:本信息仅针对企事业单位，不对个人用户适用

产品介绍

详细介绍：

糖链抗原19-9（CA19-9）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供体外研究使用

产品货号：L5E1005

预期应用

ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中糖链抗原19-9（CA19-9）的浓度，适用于胰腺，肝胆和胃癌患者的早期诊断，治疗的监测和监测癌症的复发。

概述

CA 19-9是SW-1116人结肠癌抗原在小鼠中制成的单克隆抗体19-9所识别的抗原，已证明其结构为唾液酸化的I型乳糖系岩藻五糖，共由6个糖基组成，也即唾液酸化的Lewis a抗原。人血清CA 19-9的上限为37000U/L（国外）或30000 U/L（国内），消化系统癌肿患者血清CA 19-9明显增高，如胰腺癌，肝胆系癌，胃癌和结肠癌分别可为正常均值（9400U/L）的683，535，279和115倍，阳性率分别为72.1%,66.7%，61.9%和19.0%，以胰腺癌为最高，故CA 19-9被认为是对胰腺癌较好的标志。消化系统以外的恶性肿瘤和良性疾患血清CA 19-9分别仅6.0%和1.3%（国外）超过上限，国内分别为16.7%和10%。CA 19-9诊断胰腺癌的灵敏度，特异性和PV（+）分别为69%~89%，75%~88%和54%~75%。其中对胰腺癌和肝胆系癌的阳性率均高于癌胚抗原CEA，对结直肠癌的阳性率均低于CEA，对胰腺癌的特异性也和CEA相仿或略高。约有5%~9%的胰腺炎患者，血清CA 19-9也有中等度的升高，一般不超过100000 u/L。有报导，仅约1/3的I期胰腺癌病人才见血清CA 19-9上升，故CA 19-9在胰腺癌早期诊断中的价值尚未肯定，但作为预后和病情追踪的指标则意见一致。胰腺癌手术后CA 19-9迅速降低，若重新上升往往是肿瘤复发的先兆。

实验原理

用纯化的CA 19-9抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗CA 19-9抗体的微孔中依次加入标本或标准品、HRP标记的抗CA 19-9抗体，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CA 19-9含量呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制

1. 酶联板：一块（96孔）

2. 标准品：6瓶，0.5ml/瓶。CA 19-9浓度分别为0 U/ml，5 U/ml，13 U/ml，55 U/ml，145 U/ml，450 U/ml。

3. HRP标记的抗CA19-9抗体：1×10ml/瓶。

4. TMB显色液：1×10ml/瓶。

5. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释20倍。

6. 终止液：1×5ml/瓶（2N H₂SO4）。

标本的采集及保存

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于5000 x g离心5分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 5000 x g离心5分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请5000 x g离心5分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过3个月，-80℃不应超过6个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测；高血脂的标本不需进行特殊处理，可直接检测。

操作步骤

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液40ul，余孔分别加标准品或待测样品40ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应60分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，洗涤五次，拍干。每孔加HRP标记的抗CA 19-9抗体工作液100ul，37℃,45分钟。

3. 温育后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，拍干。

4. 每孔加显色工作液100ul，37℃避光显色，15分钟。

5. 依序每孔加终止溶液50ul，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

6. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。

注：

1. 每次实验留一孔作为空白调零孔（不同于空白孔），该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液即显色液及2N H₂SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

2. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温。使用后立即冷藏保存试剂。

3. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入HRP标记抗体溶液或底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，洗板拍干后请立即加入后步试剂，应避免微孔干燥掉。

4. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

5. 在储存和温育时避免强光直接照射。

6. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。HRP标记抗体工作液、显色液工作液请依据所需的量配置使用。标准品需要重复使用时，请按需要量分装，于-20度冰箱保存。请勿重复使用HRP标记抗体工作液、显色液工作液等。

7. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水

纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需

要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

特异性

本试剂盒可同时检测重组或天然的糖链抗原19-9（CA19-9）。

计算

以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线（推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3），根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。